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C. 4. 2. Dosage par étalonnage spectrophotométrique - YouTube
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4 ème partie: exploitation des valeurs mesurées de essais, vérification de compatibilité métrologique, comparaison avec la norme et conclusion Deux essais sont réalisés en même temps que la gamme et en conditions de répétabilité Essai 1: A essai 1 à 530 nm contre blanc réactif = 0, 708 Essai 2: A essai 1 à 530 nm contre blanc réactif = 0, 702 1) Déterminer, à l'aide des paramètres de la droite, la concentration en glucides réducteurs résiduels de la bière testée pour chacun des deux essais ( ATTENTION: ne pas oublier la dilution préalable du vin). 2) Vérifier la compatibilité des 2 valeurs mesurées pour l'échantillon de bière. Dosage des glucides par spectrophotométrie 2019. Donnée: s r (écart-type de répétabilité) = 0, 37 g de glucides réducteurs résiduels. L -1 de bière En déduire la valeur retenue pour la concentration en masse de lactose dans la bière testée. 3) Comparer la valeur calculée de concentration en masse de glucides réducteurs dans la bière testée avec les informations fourniessur l'étiquette (si cette information est présente).
III. 2 Dosage de l'amidon L'amidon est dosé selon la méthode décrite par Outlaw et Manchester (1979), sous la forme d'un excès de glucose issu de l'hydrolyse de l'amidon de l'échantillon par l'amyloglucosidase. L'extrait d'amidon soluble est ensuite utilisé à raison de 100 µL par essai. L'hydrolyse de l'amidon en glucose est effectuée dans un tampon d'acétate 0, 1 M à pH 4, 75 (volume final de 700 µL), pendant 2 h d'incubation à 55°C, après l'ajout de 200 µL d'une solution d'amyloglucosidase (EC 3. 2. 1. 3. de Aspergillus niger, 40, en suspension, Sigma) à 2 µ, préparée en solution tampon acétate 0, 1 M, pH 4, 75. Après une centrifugation de 5 min à 5000 g, le glucose obtenu est dosé sur une prise d'essai de 500 µL du surnageant par une méthode colorimétrique (Nguyen et al. C.4.2. Dosage par étalonnage spectrophotométrique - YouTube. 1990). Ce dosage utilise le système enzymatique glucose oxidase et peroxydase (GOD-POD) en présence d'orthodianisidine. Le GOD oxyde le glucose en acide gluconique avec formation de H2O2 et, celui-ci, sous l'action de la POD, oxyde l'orthodianisidine (incolore à l'état réduit et rose à l'état oxydé).