Cytométrie En Image: Analyse En Cytométrie En Image - Des Outils Actuels Jusqu’au Deep Learning - Afc
CYTOMÉTRIE EN FLUX Dans le chapitre « Adjonction de la cytométrie par analyse d'images »: […] La conception de la cytométrie en flux nécessite une contrainte principale: l'obtention de suspensions monodispersées et la résistance cellulaire à des forces dues à l'entraînement dans un flux laminaire liquide. Les cellules nécessitant leur ancrage à des supports biologiques ou artificiels pour maintenir leur viabilité et préserver leur identité phénotypique n'ont pas suffisamment bénéficié de […] […] Lire la suite
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La cytométrie est l'analyse des caractéristiques (mesures) des cellules soit par l'inspection microscope ou la mesure automatisée des propriétés particulières par un cytomètre. La cytométrie en flux est une technique qui peut fournir des informations quantitatives et qualitatives sur les cellules biologiques et les microparticules. Analyse par cytométrie en flux: Les deux exigences de la cytométrie en flux sont: 1) une seule cellule à la fois peut être présente au point d'analyse, et 2) chaque cellule qui passe doit être éclairée par la même intensité de lumière. Cytométrie et ses applications en immunologie clinique - EM consulte. Explications: L'information se trouve dans la lumière qui a interagi avec les cellules lorsqu'elles passent l'une après l'autre et une à la fois à travers une région étroite éclairée par un ou plusieurs lasers. La machine qui permet de telles études est un cytomètre en flux, omniprésent dans les laboratoires biomédicaux, cliniques, d'ingénierie et environnementaux. Sa conception comprend la fluidique, l'optique d'éclairage, la photodétection, l'analyse des données et, dans certains modèles, le tri des cellules.
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La quantité de lumière mesurée correspond à la taille des cellules et à leur complexité. Les, par exemple, reflètent davantage de lumière que les lymphocytes B ou T à surface lisse en raison de la texture rugueuse de leur surface et de la quantité plus élevée de vésicules présentes dans la cellule. L'analyse de la diffraction de la lumière selon un angle plat est appelée prodiffusion (FSC, forward scatter), laquelle dépend du volume de la cellule. L'analyse de la diffraction de la lumière dans un angle droit est appelée diffusion latérale (SSC, sidewards scatter). Elle dépend de la granularité, de la taille des cellules, de la structure de leur noyau, et de la quantité de vésicules contenues dans les cellules. Par exemple, il est possible de distinguer des globules rien qu'en observant ces deux analyses (Fig. 1). Fig. 1. Intérêt de la cytométrie en analyse d’image dans la détermination du caractère localisé du cancer de la prostate - ScienceDirect. Caractérisation de cellules non colorées à l'aide d'une diffusion de lumière (graphique à points) En haut à droite: grosses cellules En haut: cellules granulaires Les grosses cellulaires granulaires (par ex., les) sont visibles en haut à droite tandis que les petits globules blancs, qui sont lisses, sont visibles en bas à gauche.
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CISA est membre du Réseau LUMIC de plates-formes d'imagerie et de cytométrie de Sorbonne Université et du Réseau LUMIC labélisé IBiSA.
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A) La fraction de cellules positives pour l'Annexine V et pour le PI a été déterminée par cytométrie en flux (volet supérieur) et cytométrie d'image (volet inférieur). Chaque tarte représente la moyenne de six échantillons (trois échantillons indépendants analysés en double). B) Micrographie de cellules CHO traitées au CPT. Cytométrie par analyse d image host planeteoueb com. La micrographie a été produite par superposition d'images capturées respectivement dans les canaux bleu (Hoeschst-33342), vert (Annexine V-FITC) et rouge (PI) du NucleoCounter® NC-3000™. Les flèches indiquent les quatre populations différentes présentes dans les échantillons. Le grossissement optique de l'instrument est ×2. Visualiser l'ensemble de données dans l'affiche PDF. Conclusion « Nous avons utilisé un cytomètre en image, le NucleoCounter ® NC-3000™, pour quantifier différents événements du processus apoptotique. Comparé à la cytométrie en flux (BD LSRII), le NC-3000™ a démontré une détermination précise et rigoureuse de la translocation de la phosphatidylsérine, de l'activation de la Caspase 3/7 et de la dépolarisation du potentiel de la membrane mitochondriale.
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Les résultats à 18 h d'incubation ont montré que la rapamycine induisait un niveau d'activité autophagique plus élevé que le tamoxifène. Il est important de noter que le tamoxifène à 100 µM est hautement cytotoxique, entraînant la mort et la désintégration des cellules Jurkat après 18 h d'incubation. Cytométrie par analyse d'images. La vérification basée sur l'image de l'effet de cytotoxicité du tamoxifène à forte concentration peut être très utile pour éliminer les incertitudes provenant uniquement des résultats du diagramme de dispersion et de l'histogramme. La cytométrie d'image a démontré des résultats comparables à la cytométrie en flux standard pour l'analyse à base de cellules fluorescentes (Chan et al., 2011; Robey et coll., 2011). La méthode de cytométrie basée sur l'image peut offrir plusieurs avantages par rapport à la cytométrie en flux. Par exemple, le nombre de cellules requis pour chaque échantillon (10-20 µL) est nettement inférieur à un cytomètre en flux classique (300-500 µL). La configuration initiale sur le cytomètre en flux nécessite que certains des échantillons de cellules cibles soient utilisés pour les tensions PMT et le réglage de la compensation.